CEPT 由4種成分組成,取其組成成分(Chroman 1、Emricasan、Polyamines、Trans-ISRIB)的開(kāi)頭字母命名為“CEPT”。
研究 表明,CEPT可防止人ES/iPS細(xì)胞(人多能干細(xì)胞;hPSCs)在細(xì)胞傳代中的細(xì)胞應(yīng)激和DNA損傷,還可提高細(xì)胞傳代
和凍 存時(shí)hPSCs的存活率。
Fujifilm wako 033-26071 CultureSure? CEPT Cocktail(1,000×)
01 特點(diǎn)
● 從DNA損傷等細(xì)胞應(yīng)激中保護(hù)ES/iPS細(xì)胞,維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能
● 已進(jìn)行過(guò)濾滅菌的即用型混合溶液
● 已通過(guò)內(nèi)毒素測(cè)試以及支原體陰性檢測(cè)的CultureSure系列
02 測(cè)試項(xiàng)目
● 濃度(HPLC):已通過(guò)測(cè)試
● 外觀:液體
● 內(nèi)毒素:<3 EU/mL
● 已完成無(wú)菌測(cè)試
● 已完成支原體陰性測(cè)試
03 使用方法
以1/1,000的量添加本品至培養(yǎng)基,充分混合后使用。
※使用注意
● 本產(chǎn)品為凍存品(-20°C)。為避免反復(fù)凍融,建議根據(jù)使用量分裝凍存。
● 溶解時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)沉淀,并非產(chǎn)品質(zhì)量問(wèn)題,請(qǐng)直接使用。(沉淀于37°C下靜置1~2 h可能會(huì)溶解,請(qǐng)避免反復(fù)冷凍和加熱。)
04 適用范圍
樣品:人ES/iPS細(xì)胞
應(yīng)用:
05 性能數(shù)據(jù)
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure? hPSCΔ培養(yǎng)基,在37°C,5% CO2的條件下培養(yǎng)人iPS細(xì)胞201B7株(6孔板1 well=9.5cm2)。
培養(yǎng)經(jīng)過(guò)16 h以后,更換不含CEPT或Y-27632的培養(yǎng)基,每2~3天更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
培養(yǎng)第8天時(shí),確認(rèn)細(xì)胞后,使用4%多聚甲醛固定細(xì)胞,ALP染色后,計(jì)數(shù)細(xì)胞集落。
單細(xì)胞克隆測(cè)試
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure? hPSCΔ培養(yǎng)基,在37°C,5% CO2的條件下培養(yǎng)人iPS細(xì)胞201B7株(96孔板)。
培養(yǎng)經(jīng)過(guò)16 h以后,更換不含CEPT或Y-27632的培養(yǎng)基,每2~3天更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
培養(yǎng)第13天時(shí),確認(rèn)細(xì)胞后,使用4%多聚甲醛固定細(xì)胞,ALP染色后,計(jì)數(shù)形成細(xì)胞集落的孔數(shù)與空孔數(shù)。
通過(guò)所有孔數(shù)與細(xì)胞集落形成孔數(shù)之比,計(jì)算細(xì)胞集落形成率。
【結(jié)果】
細(xì)胞接種數(shù)少時(shí),添加CEPT的組比添加Y-27632的組形成的細(xì)胞集落更多。
未分化人iPS細(xì)胞的維持確認(rèn)
【細(xì)胞株】人iPS細(xì)胞201B7株
【培養(yǎng)基】StemSure? hPSC培養(yǎng)基Δ+35 ng/mL bFGF
Red:rBC2LCN-635(人iPS細(xì)胞膜染色)
Blue:DAPI(細(xì)胞核染色)
※ BC2LCN是一種對(duì)存在與人ES/iPS細(xì)胞的膜表面的糖鏈具有高親和性的重組凝集素
【結(jié)果】
添加CEPT時(shí)與添加Y-27632時(shí)都未觀察到細(xì)胞形態(tài)的差異,均可確認(rèn)未分化維持狀態(tài)。
產(chǎn)品列表
品牌 | 貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
Fujifilm wako | 033-26071 | CultureSure(TM) CEPT Cocktail(1,000×) | 300μL |